VIII. HISTOQUÍMICA.

1. Generalidades de histoquímica (tinciones) aplicada a microscopia.



2. Colorantes ácidos y básicos.



3. Hematoxilina y eosina.



4. Tinciones para tejido conectivo: fibrina, colágena, fibras elásticas, fibras reticulares.

5. Tinciones para glucógeno y mucinas (proteoglicanos, sulfomucina, sialomucina, ácido hialurónico).

6. Tinciones para lípidos.

7. Tinciones para ácidos nucléicos (ADN, ARN).



8. Tinciones para pigmentos (hemosiderina, melanina, lipofuscina, substancias cromafines) y minerales (calcio, cobre).

9. Tinciones para amiloide.

10. Tinciones para microorganismos: micobacterias, bacterias, actinomicetos, hongos, protozoarios, parásitos.

11. Tinciones para organelos y gránulos citoplásmicos (células cebadas, cuerpos hialino-alcohólicos, regiones organizadoras de nucléolos -'NORs'-, gránulos neuroendocrinos -argirófilos y argentafines-).

12. Tinciones en neuropatología (neuronas, células gliales, axones, mielina).

13. Tinciones hematológicas (de Romanovsky).

VII. TÉCNICA HISTOLÓGICA.

1. Definición de técnica histológica.

2. Pasos secuenciales de la técnica histológica con parafina para microscopio óptico.

3. FIJACIÓN:

3.1 Acciones generales de los fijadores.

3.2 Factores que influyen en la fijación: pH, temperatura, penetración, duración, etc.

3.3 Clasificación de fijadores (aldehídos, agentes oxidantes, coagulantes, etc.)

3.4 Fijadores más comunes: formaldehido, glutaraldehído, tetraóxido de osmio, dicromato de potasio, permanganato de potasio, ácido acético, alcohol metílico y etílico, cloruro de mercurio, ácido pícrico, etc.).

3.5 Mezclas de fijadores: soluciones de formaldehído, solución de Carnoy, Bouin, Zenker.

3.6 Fijación de substancias especiales (lípidos, carbohidratos, etc.).

3.7 Fijación para técnicas especiales (histoquímica enzimática, microscopia electrónica, inmunofluorescencia, inmunohistoquímica, citometría de flujo).

3.8 Fijación especial para tejidos específicos (ojo, riñón, hígado, ganglios linfáticos, etc.)

3.9 Artificios por fijación (*ver referencia al final).

4. DESHIDRATACIÓN (agentes deshidratantes: etanol, metanol, alcohol isopropílico, acetona).

5. ACLARAMIENTO (agentes aclarantes: xileno, tolueno, cloroformo, etc.).

6. IMPREGNACIÓN E INCLUSIÓN (parafina y otros agentes -resinas, agar, gelatina, celoidina, etc.-).

7. CORTE (microtomo).

8. Procesamiento automatizado.

9. Cortes por congelación (criostato).

10. Descalcificación.


*El tema de TINCIÓN, que forma parte de la técnica histológica, lo revisaremos más adelante, cuando hablemos de histoquímica.

* Vayan al Google Drive de patologiahgm@gmail.com/PATOLOGIA HGM/R-1/CURSO DE INTRODUCCIÓN y bajen el artículo que aparece en esa carpeta como "efecto de la fijación en inmunohistoquímica" (en PDF)  de Werner M y cols. 'Effect of Formalin Tissue and Processing on Immunohistochemistry', Am J Surg Pathol 2000; 24(7):1016-1019, léanlo y hagan un resumen.