XVII. PATOLOGÍA MOLECULAR

(1) AISLAMIENTO DE MATERIAL GENÉTICO: suspensiones cleulares frescas o criopreservadas, tejido fresco, congelado o en parafina, microdisección.

(2) SONDAS: tipo y forma de marcaje.

(3) TÉCNICAS EMPLEADAS: amplificación de ácidos nucléicos (reacción en cadena de polimerasa o 'PCR'), dot-blot, Southern-blot, hibridación in situ, hibridación in situ fluorescente, secuenciación, análisis de micromatrices.

(4) Generalidades de la técnica de reacción en cadena de polimerasa ('PCR').

(5) Generalidades de la técnica de Southern-blot (enzimas de restricción, desnaturalización del ADN, electroforesis, aplicaciónde sondas, etc.).

(6) Generalidades de la técnica de hibridación in situ e hibridación in situ fluorescente ('FISH') (en células metafásicas -cromosomas-, e interfásicas).

(7) Algunos ejemplos de aplicación diagnóstica en enfermedades infecciosas

(8) Algunos ejemplos de aplicación diagnóstica en neoplasias:

(8.a) Predisposición genética (poliposis adenomatosa del colon, síndromes de neoplasias endocrinas múltiples, retinoblastoma familiar, síndrome de Von Hippel-Lindau, síndrome de cáncer colorrectal no asociado a poliposis -Lynch-, síndrome de cáncer hereditario de mama-ovario, síndrome de Li-Fraumeni).

(8.b) Detección precoz de cáncer (carcinoma de cérvix, esófago de Barrett)

(8.c) Diagnóstico de tipos específicos de neoplasias:

(8.c.1) Translocaciones específicas en neoplasias linfohematopoyéticas (linfomas folicular, del manto, de Burkitt, de la zona marginal, anaplásico de células grandes, etc.)

(8.c.2) Translocaciones específicas en sarcomas (sarcoma de Ewing/tumor neuroectodérmico primitivo, tumor desmoplásico de células redondas y pequeñas, liposarcoma mixoide, condrosarcoma mixoide, sarcoma sinovial, rabdomiosarcoma alveolar, dermatofibrosarcoma protuberans).

(8.d) Análisis de expresión génica (micromatrices).

(8.e) Análisis de clonalidad en neoplasias linfoides.

(8.f) Determinación pronóstica.

*Para este tema deben leer y elaborar un resumen del siguiente artículo: Wistuba OI. 'Patología molecular: aplicaciones de la biología molecular en anatomía patológica'. Rev Méd Chile 2001;129(7):1-16. También les recomiendo leer la parte final del capítulo 'enfermedades genéticas' de la versión más reciente que puedan encontrar de Patología Estructural y Funcional de Robbins especialmente para la técnica de Southern-blot y el recuadro de 'análisis de expresión génica (micromatrices)' que aparece en la parte final del capítulo de 'neoplasia'.